生物化学方法

像其他科学一样,生物化学的目标是量化或测量结果,有时需要复杂的仪器。研究生物体内事件的最早方法是分析进入生物体内的物质(食物、氧气)和离开生物体内的物质(排泄产物)。二氧化碳)。这仍然是在动物身上进行的所谓平衡实验的基础,例如,在这种实验中,食物和排泄物都被彻底分析。为此目的,许多涉及特定颜色反应的化学方法已经发展出来,这些方法需要光谱分析仪器(分光光度计)进行定量测量。气体计量技术通常用于测量氧气而且二氧化碳,屈服呼吸商(二氧化碳与氧气的比率)。通过确定进入和离开给定物质的数量,可以获得更多的细节器官也可以通过培养a切片组织在体外的生理介质中分析介质中发生的变化。因为这些技术可以得到代谢能力的全貌,所以有必要破坏细胞结构(均质化),分离出细胞核、线粒体、溶酶体、核糖体、膜的各个部分,最后分离出细胞中的各种酶和不同的化学物质细胞为了理解化学更充实的生活。

离心电泳

生物化学研究中的一个重要工具是离心机,通过快速旋转强加悬浮粒子,甚至溶液中的分子受到的高离心力,使这些物质根据重量的不同而分离。因此,红细胞可以被分离等离子体血液中,细胞匀浆中线粒体的核,还有一个蛋白质从另一个复杂的混合物。蛋白质由超速离心法-高速纺丝;当蛋白质层在离心场中形成时,对它们进行适当的摄影,就有可能确定蛋白质的分子量。

被用于分离和分析的生物分子的另一个特性是它们的电荷.氨基酸和蛋白质具有净正电荷或负电荷,这取决于它们所在溶液的酸度溶解.在一个电场,这些分子采用不同的迁移速率向正极(阳极)或负极(阴极)迁移,并允许分离。这种分离可以在溶液中或当蛋白质饱和于固定介质时发生纤维素(滤纸),淀粉或丙烯酰胺凝胶。通过适当的蛋白质显色反应和扫描颜色强度,可以测量混合物中的许多蛋白质。分离的蛋白质可以用电泳,并且可以确定给定蛋白质的纯度。(人体电泳血红蛋白揭示了镰状细胞性贫血的异常血红蛋白,这是“分子疾病”的第一个明确例子。)

色谱和同位素

不同的溶解性对水和有机溶剂中的物质提供了另一种分析依据。在其早期形式中,分离是在复杂的装置中通过将物质划分在各种溶剂中进行的。这一原理的简化形式演变为"纸色谱法,其中少量的物质可以在滤纸上分离,并通过适当的颜色反应进行识别。与电泳相比,该方法已广泛应用于各种生物化合物对生物化学研究做出了巨大贡献。

一般原理已从滤纸条推广到其他相对惰性介质的柱状物,允许更大规模分离和鉴定密切相关的生物物质。特别值得注意的是氨基酸的色谱分离离子交换树脂,允许准确测定氨基酸作文的蛋白质。在这样的确定之后,有机化学的其他技术已经被用来阐明复杂蛋白质中氨基酸的实际序列。另一个技巧柱层析法是基于分子渗透到复合物珠的相对速率碳水化合物根据分子的大小。相对于较小的分子,较大的分子被排除在外,首先从这样的珠柱中出现。这项技术不仅可以分离生物物质,而且还可以估计分子量。

也许是最重要的技巧解体的复杂性新陈代谢一直使用同位素(重元素或放射性元素)标记生物化合物,并“追踪”它们在代谢中的命运。同位素标记化合物的测量需要相当大的技术质谱法还有放射性探测装置。

其他各种物理技术,如核磁共振,电子自旋光谱学、圆二色和x射线晶体学,已成为揭示化学结构与生物功能关系的重要工具。

埃尔默·h·斯托兹 Birgit Vennesland