库姆斯测试
当一个不完全抗体反应与红细胞生理盐水,抗原网站成为涂有抗体球蛋白(丙种球蛋白),没有可见的凝集反应发生。丙种球蛋白的存在可以检测到细胞上的库姆斯测试,以其发明者的名字命名,英语免疫学家罗伯特·库姆斯。库姆斯血清(也称为反人类的球蛋白)是由与人体丙种球蛋白免疫兔子。兔子的反应通过反人类的球蛋白(即。,人体丙种球蛋白和抗体补充在使用前),然后纯化。反人类的球蛋白通常含有免疫球蛋白抗体和补充。库姆斯血清添加到洗细胞;管离心机;如果细胞涂布丙种球蛋白或补充,啤切将形成。新的抗球蛋白试剂(由免疫纯化蛋白)可以检测球蛋白或补充。取决于它是如何执行的,库姆斯测试可以检测不完全抗体的血清或抗体绑定到红色细胞膜。在某些疾病,贫血可能是由于红细胞与丙种球蛋白的涂层。这可能发生当一个母亲使她的新生儿红细胞抗体或者如果一个人让一个自身抗体对自己的红细胞。
吸附、洗脱和滴定
如果一个血清包含抗体的混合物,可以准备纯样品的每个技术称为吸附。在这种技术中删除不必要的抗体通过混合红细胞携带适当的抗原。抗原与抗体结合到交互细胞表面。这些红色细胞由离心清洗彻底,旋转紧,上面所有的液体细胞被移除,然后细胞包装。细胞包装以避免稀释的抗体。吸附是一个方法分离混合物的抗体通过删除一些,让别人。它是用来识别抗体混合物和净化试剂。库姆斯的纯化血清(见上图)是用同样的方式完成的。
如果红细胞吸附丙种球蛋白到他们的表面抗体有时会恢复的过程称为洗脱。一个简单的洗脱方式(分离)抗体洗红细胞是热在56°C (133°F)在小体积的生理盐水。其他方法包括使用酸或醚。这种技术有时候是有用的抗体的识别。
滴定法用于确定抗体的力量。两倍稀释的抗体是由一系列管适用介质。添加细胞携带相应的抗原,凝集反应是阅读和得分的程度的积极性。的实际浓度的稀释抗体是由某种程度的凝集,然而弱,仍然可以看到。这不是一个安全的稀释用于血型的目的。如果一个抗血清可以稀释,稀释选择必须与选择,强阳性反应积极控制细胞。滴定是有益的在准备试剂和比较抗体浓度在不同的时间间隔。
抑制试验
抑制测试用于检测抗原的存在血组织特异性的解决方案;抑制一个已知antibody-antigen反应液表明特定的血型专一性。如果一个活性物质添加到抗体,抗体的中和活动时防止凝集红细胞携带适当的抗原随后添加到混合物中。A, B,刘易斯Chido,罗杰斯,P抗原是现成的,可以用来促进抗体识别。这种技术被用来阐明ABH的生物化学,二世和刘易斯系统,是很重要的法医学作为一种识别抗原的血迹。
溶血
实验室测试中溶血(毁灭)红细胞的终点并不是经常用于血液分组。溶血发生的特定组件的新鲜血清补充必须存在。补充必须添加到抗体和红细胞的混合物。它有时可能需要寻找溶血素破坏组的红细胞在母亲组的孩子是不相容或个人,不属于组或AB,与未接种疫苗破伤风包含物质与A组特异性类毒素。
溶血性反应可能发生在患者输血的血是不相容的,或者已经发生溶血。这样的病人需要特别调查的血清检测的存在血红蛋白已经逃离体内红细胞破坏和分解产物的其他红细胞成分。