方法
色谱方法根据以下标准进行分类:(1)系统的几何结构,(2)的操作模式,(3)保留机制,和(4)阶段。
几何
柱层析法
色谱系统的移动和静止阶段被安排在这样一种方式,移民是一个坐标更长的时间比它的宽度。有两种基本的几何图形:柱状,平面。在柱层析法固定相包含在一个叫做列管。一个包装列包含粒子构成或支持固定相,和移动阶段流经的通道间隙空间。理论表明,性能增强如果使用非常小的颗粒,同时确保所需的额外功能,这些通道非常狭窄。流动相的影响传质在乐队(峰值)扩大将降低(见下文传质和峰值展宽的讨论效率和分辨率和理论的考虑)。构建固定相薄层或电影将降低频带拓宽由于固定相的传质。多孔粒子,要么作为吸附剂或支持液体,深入毛孔,延长整个粒子。这导致频带展宽。使用微粒减轻因为渠道缩短。另一种包装方法是外套不透水宏观粒子,如玻璃珠子,一层薄薄的微粒子。这些是多孔、表面多孔或薄膜的包装。然而,随着粒径减小柱的直径也必须减少。因此,固定相的数量少,样本容量必须降低。检测方法必须应对非常少量的溶质,和大的压力需要强制流动相通过列。极端情况下被称为微内径列;一个例子是一个列35厘米(14英寸)长320微米(1微米= 10−4厘米内)直径挤满了2-micrometre粒子直径。
第二列几何包括涂层的内侧壁上固定相直径较小的不锈钢钢或者融合硅管。这些都是开管式列。涂层可能是液体还是固体。气体移动阶段,优越的性能是由于长度和固定相的薄膜。列是高度渗透气体,不需要过度驱动压力。列中液体流动相使用短很多,需要大的驱动压力。
平面层析法
在这种几何配置固定相薄的二维表。在纸色谱法表或窄带钢纸作为固定相。在薄层色谱法固定相的固体颗粒的薄膜绑定在一起的机械强度与粘结剂,如钙硫酸,是涂在玻璃板或塑料表。表的一个边缘浸入流动相的储层,由毛细行动,在床上垂直于运行表面的流动相。这比溶质毛细运动快速扩散在直角的流动相迁移路径,所以溶质是局限于一个狭窄的道路。
操作方式
发展色谱法
在操作方面,在发展色谱流动相流停止溶质达到固定相的床尾。流动相被称为开发人员,和液体的运动在床上被称为发展。用玻璃列厘米直径的范围和大样本(立方厘米范围)从列床挤压,溶质区雕刻出来,溶质恢复溶剂提取。虽然这很容易完成用彩色的溶质,无色溶质需要检测的一些方式,比如紫外线吸收或荧光或列的裸奔的试剂与溶质反应生成有色产品。
平面系统包括将样品(10−3立方厘米范围),地点在一个固定床的边缘平行于开发人员。溶质区位于床光辐照或喷洒colour-producing试剂。迁移的报道Rf价值,感动的距离区域中心相对于流动相,感动的距离,测量从原点。的使用溶剂前作为一个参考点通常是不方便。通常包括一个标准溶质,溶质的迁移相对于标准的报告为相对的R价值。如果需要更大样本的后续操作,同时执行分离或示例应用作为固定相连续。最后点或乐队是雕刻或切割色谱图。在一种平面色谱法中,混合物放置在广场的一个角落里床,板,或表和发达,流动相是蒸发和板旋转90°,景点成为第二个发展的起源有不同的开发人员。这是被称为二维平面色谱法。