组织培养

组织培养这是一种生物学研究方法组织从动物或植物转移到人造的环境这样它们才能继续生存和发挥作用。的培养组织可以由单个组织组成细胞细胞群，细胞的全部或部分器官．细胞文化可能繁殖;改变大小、形式或功能;表现出专门的活动(例如，肌肉细胞可能会收缩);或者与其他细胞相互作用。

历史发展

1885年，一位德国动物学家对组织培养进行了早期尝试威廉Roux,他培养小鸡的组织胚胎在温盐溶液中。然而，第一次真正的成功是在1907年，当时美国动物学家罗斯·g·哈里森演示了青蛙的成长神经细胞在凝结的介质中进行的过程淋巴．法国外科医生想到这个和他的助手蒙特罗斯·巴罗斯随后改进了哈里森的技术，并在1910年至1911年发表的一系列论文中报告了他们最初的进展。Carrel和Burrows创造了这个术语组织培养并定义了这个概念。此后，许多实验者都成功了培养动物细胞，用各种生物液体作培养基，如淋巴、血清、血浆和组织提取物。在20世纪80年代和90年代，研究人员开发出了能够成功培育哺乳动物胚胎的方法干细胞在人工条件下。这些突破最终使人类胚胎得以建立和维持干细胞这促进了研究者对人类的认识生物学并极大地促进的进展治疗而且再生医学．

文化环境

细胞可以在培养基中生长培养基生物来源的，如血清或组织提取物，在化学定义合成中等或两者的混合。培养基必须含有被研究细胞所必需的营养物质的适当比例，并且必须是适当的酸性或碱性。文化通常以单层细胞形式在玻璃或塑料表面生长，或以悬浮形式在液体或半固体介质中生长。

为了启动培养，将微小的组织样本分散在培养基上或在培养基中，然后将含有培养物的烧瓶、管或板孵育，通常在接近组织正常环境的温度下孵育。保持无菌条件以防止微生物污染。培养有时从单细胞开始，从而产生统一的生物群体称为克隆．单细胞通常在培养条件下10 - 14天内产生菌落。

原代培养和建立的细胞系

有两种主要类型的培养:原代(死亡)培养和已建立(不朽)细胞系培养。原代培养由正常细胞、组织或器官组成切除直接从组织中采集活组织检查从一个活的有机体。原代培养的优势在于，它们基本上模拟了所研究的细胞、组织或器官的自然功能。然而，样本在培养中保持的时间越长，它们积累的突变就越多，这可能导致染色体结构和细胞功能的变化。此外，原始培养物通常是致命的。细胞经历一个衰老过程，在此过程中，它们只繁殖50到100代，之后速度显著下降。原代培养细胞停止生长或经历复制性衰老的临界点，标志着所谓的海弗利克极限(以其发现者、美国微生物学家伦纳德·海弗利克命名)。

相比之下，已建立的细胞系可以延续下去。这样的细胞系通常来源于患者的肿瘤活检，或者它们可能来自经历突变的原代细胞，这些突变使它们能够克服海弗利克极限并继续复制。与原代培养中的细胞类似，已建立系的细胞随着时间的推移积累突变，可以改变它们的特性。因此，为了让来自不同实验室的研究人员能够比较使用相同细胞系的实验结果，他们必须确认他们所研究的细胞的身份。细胞身份是通过一个被称为认证的过程来验证的，在这个过程中，培养细胞的DNA轮廓与该细胞系的已知或标准轮廓进行比较。