微生物鉴定

微生物测定只适用于B族维生素。一种需要维生素的微生物的生长速率是在含有各种已知量的含有未知量维生素的食品制剂的生长介质中测量的。对未知量的维生素的反应(以生长速度衡量)与从已知量的纯维生素中获得的反应进行比较。根据制备食物样品的方式，该程序可以指示食物样品中维生素对微生物的可用性。

动物分析

所有的维生素，除了维生素B₁₂，可通过动物分析技术估计。这种方法的一个优点是动物只对维生素的生物活性形式有反应。另一方面，可能会出现许多其他干扰和复杂因素;因此，实验必须严格规范和控制。同时进行的估计通常是使用纯标准维生素制剂作为参考，并使用所寻找的维生素含量未知的食物;每个测试重复使用两种或两种以上不同量的标准和未知的测定方法。

在一个生长试验，老鼠小鸡，狗(专门用于烟酸)，和豚鼠(专门用于维生素C)通常使用。一个标准在维生素测定中使用的方法是根据饮食中某种特定维生素的不同含量来增加体重。有两种类型的生长试验。在一项预防性生长试验中，测量给予不同剂量维生素的幼龄动物的体重增加。在治疗性生长试验中，先剥夺动物的维生素，然后再给予不同数量的维生素，测量动物的体重增加。治疗性生长试验往往比预防性技术提供更一致的结果。

在一个反应时间试验，动物首先被剥夺一种维生素，直到特定的缺乏症状出现;然后给动物服用已知量的含有维生素的食物提取物，缺乏症状在一两天内消失。当动物再次被剥夺维生素时，特定症状再次出现所需的时间提供了最初给予维生素量的衡量标准。分级反应试验，可能是预防性的或治疗性的，取决于特征反应的程度随维生素剂量的不同而不同。这种技术的一个例子是对维生素D其中测得的一条腿的灰分含量骨大鼠或小鸡的钙钙含量是用来反映由于摄入一定量的维生素d而发生的骨质钙化程度分析，反应程度无法测量;选择一个任意的水平来区分积极的反应和消极的反应。积极反应动物的百分比提供了反应的衡量标准;也就是说,维生素E可以通过获得成功交配的雌性大鼠的生育力百分比来测量。