了解如何使用琼脂糖凝胶、Southern blotting和放射性DNA探针制作遗传指纹
成绩单
要获得基因指纹首先要有生物组织的样本。在伦敦的盖伊医院,这位研究人员正在使用自动DNA提取器从血液样本中提取高纯度的DNA片段。
限制性内切酶被添加到DNA中。这种酶沿着DNA链移动,在所谓的限制位点切割它。酶可用的限制位点位于整个染色体,除了由核心序列副本组成的部分。这一过程产生了许多DNA片段,这些片段由核心序列的重复组成。
然后将这些DNA片段的混合物放在琼脂糖凝胶上。
在凝胶上施加一个小电压,碎片以与其大小成正比的速率在凝胶中移动。由于凝胶很难处理,凝胶上的DNA带图案通过称为Southern blotting的技术转移到尼龙膜上。
首先,将尼龙膜放在琼脂糖凝胶上。然后,在膜上分层吸收纸。它就像一个灯芯,把DNA带拉到膜上,粘在那里。
最后,研究人员添加了一个放射性DNA探针,它将与核心序列特异性结合。多余的DNA探针被洗掉,只留下与膜上DNA图案结合的放射性探针。
这可以在x射线胶片上显示出来,产生基因指纹。
限制性内切酶被添加到DNA中。这种酶沿着DNA链移动,在所谓的限制位点切割它。酶可用的限制位点位于整个染色体,除了由核心序列副本组成的部分。这一过程产生了许多DNA片段,这些片段由核心序列的重复组成。
然后将这些DNA片段的混合物放在琼脂糖凝胶上。
在凝胶上施加一个小电压,碎片以与其大小成正比的速率在凝胶中移动。由于凝胶很难处理,凝胶上的DNA带图案通过称为Southern blotting的技术转移到尼龙膜上。
首先,将尼龙膜放在琼脂糖凝胶上。然后,在膜上分层吸收纸。它就像一个灯芯,把DNA带拉到膜上,粘在那里。
最后,研究人员添加了一个放射性DNA探针,它将与核心序列特异性结合。多余的DNA探针被洗掉,只留下与膜上DNA图案结合的放射性探针。
这可以在x射线胶片上显示出来,产生基因指纹。